正确答案:

有碱基修饰的DNA 存在二级结构的DNA 超过1000个碱基的DNA

ABC

题目:Sanger法难以一次性分析的样品包括

解析:原理是采用核苷酸链终止剂—2,,3,-双脱氧核苷酸终止DNA的延长。由于它缺少形成3/5/磷酸二脂键所需要的3-OH,一旦参入到DNA链中,此DNA链就不能进一步延长。根据碱基配对原则,每当DNA聚合酶需要dNMP参入到正常延长的DNA链中时,就有两种可能性,一是参入ddNTP,结果导致脱氧核苷酸链延长的终止;二是参入dNTP,使DNA链仍可继续延长,直至参入下一个ddNTP。根据这一方法,就可得到一组以ddNTP结尾的长短不一的DNA片段。方法是分成四组分别为ddATP、ddGTP、ddCTP、ddTTP反应后,聚丙烯酰胺凝胶电泳按泳带可读出DNA序列Sanger法难以一次性分析的样品有:1. 有碱基修饰的DNA 2. 存在二级结构的DNA 3. 超过1000个碱基的DNA

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  • 待测模板

    测序引物

    标记的dNTP

    凝胶电泳

  • 解析:原理是采用核苷酸链终止剂—2,,3,-双脱氧核苷酸终止DNA的延长。由于它缺少形成3/5/磷酸二脂键所需要的3-OH,一旦参入到DNA链中,此DNA链就不能进一步延长。根据碱基配对原则,每当DNA聚合酶需要dNMP参入到正常延长的DNA链中时,就有两种可能性,一是参入ddNTP,结果导致脱氧核苷酸链延长的终止;二是参入dNTP,使DNA链仍可继续延长,直至参入下一个ddNTP。根据这一方法,就可得到一组以ddNTP结尾的长短不一的DNA片段。方法是分成四组分别为ddATP、ddGTP、ddCTP、ddTTP反应后,聚丙烯酰胺凝胶电泳按泳带可读出DNA序列Sanger法的测序体系:1. 待测模板 2. 测序引物 3. 标记的dNTP 4. 凝胶电泳

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